《高效液相色谱在药物分析的应用实例》·南京科捷分析仪器有限公司
例一、磺胺分析
样 品:磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,740色谱数据处理机
检测器:UV 481型紫外检测器,波长240nm
色谱柱:μ-Bondapak C18 , 5μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm
流动相:由KH2PO4(0.05mol/L)和Na2HPO4(0.05 mol/L)以及MeOH所组成,其用量比例为200:10:165,
流 速:1mL/min
进 样:10μL
结 果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:磺胺保留时间为2.60 min, 磺胺嘧啶保留时间为3.18 min、磺胺甲基异噁唑保留时间为4.33 min,甲氧苄氨嘧啶保留时间为5.19min。
例二、银杏内酯分析
样 品:含银杏苦内酯等4种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器,Rheadyane 77251进样阀,HP化学工作站
检测器:500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为91℃,氮气流速为2.75L/min
色谱柱:Platinum OPS,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:水:甲醇:四氢呋喃 = 75:20:10
流 速:1mL/min
进 样:10μL
结 果:所有组分在15min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为银杏苦内酯C, 峰2为白果内酯, 峰3银杏苦内酯A, 峰4为银杏苦内酯B。
例三、脂肪酸甲酯分析
样 品:含5种脂肪酸甲酯的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为45℃,氮气流速为1.5L/min
色谱柱:Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:乙腈:甲醇 = 2:98
流 速:0.75mL/min
进 样:10μL
结 果:所有组分在10min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为C18:0脂肪酸甲酯,峰为C18:1脂肪酸甲酯,峰3为C18:2脂肪酸甲酯,峰4为C18:3脂肪酸甲酯,峰1为C20:4脂肪酸甲酯。
例四、嘌呤分析
样 品:取1mL血浆加入200μL的1.98mol/L的高氯酸(GR),再加入600μL蒸馏水和200μL的1.47mol/L的别嘌呤醇(内标),用旋转混合器振摇10s于1200g离心10min,取上层清液备分析用。
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:UV紫外检测器,254nm
色谱柱:μBondapsk C18 ,10μm,柱长30cm,柱径3.9mm
流动相:0.02mol/L的磷酸二氢钾,pH = 2.2
流 速:2.0mL/min
进 样:10μL
结 果:所有组分在12min之内全部流出,各组分分离完全,保留时间依次为:尿嘌呤为3.18min(峰1),腺嘌呤为3.21 min(峰2),次黄嘌呤为3.90 min(峰3),5-羟基吡嗪酸为4.75min(峰4),5-羟基吡嗪胺为5.31 min(峰5),黄嘌呤为5.90 min(峰6),吡嗪酸为7.35min(峰7),内标别嘌呤醇为8.53min(峰8),吡嗪胺为9.57min(峰9)。
例五、抗菌素分析
样 品:含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器,Rheadyane 77251进样阀,HP化学工作站
检测器:2000型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃,氮气流速为2.0L/min
色谱柱:AlltimaTM C18 ,5μm,柱长15cm,柱径4.6mm
流动相:A为0.2% 五氟丙酸, B为甲醇
梯 度:时间 0min 5min
A/B 55%/45% 35%/65%
流 速:1mL/ min
进 样:10μL
结 果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为红霉素,峰2为链霉素,峰3为托布霉素,峰4为阿米卡星,峰5为新霉素。
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高效液相色谱在药物分析的应用实例
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